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ACTH刺激試驗又稱為處腎上腺皮質激素刺激試驗，其臨床的適應范圍是用于腎上腺皮質功能減退者。試驗的方法是在試驗前留24小時尿，測定尿的17-羥皮質類固醇、17酮皮質類固醇，或者在試驗開始前測定血漿的皮質醇，在試驗的當日使用促腎上腺皮質激素25個單位，溶于5%的葡萄糖液500mL中，連續(xù)靜滴八小時，收集試驗日的24小時尿液，再次測定17-羥皮質類固醇、17-酮皮質類固醇。
試驗采血兩天的方法，通過測定的數值，正常情況下注射ACTH后血漿的皮質醇可以明顯地增高。而對原發(fā)性皮質功能減退者，17-羥皮質類固醇沒有反應或者上升很少。