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女性患者進行導尿術需要兩次消毒。第二次消毒順序為先消毒尿道口周圍，而后向四周放射到小陰唇及女性陰道口，再向外輻射到大陰唇至大腿內側，最后消毒肛門附近。與第二次相反，第一次消毒順序為由外向內，先消毒陰阜，而后逐漸向內對大腿內側及大陰唇進行消毒，最后消毒小陰唇。

二次消毒與一次消毒順序相反的主要原因為正常女性陰道口附近及尿道口周圍存有細菌，第一次消毒需由清潔到有菌區(qū)域進行消毒，消毒完畢后即可認定小陰唇及尿道口周圍處于無菌狀態(tài)。

第二次消毒是由內向外，從尿道口向四周放射，通過兩次消毒以確保女性尿道口附近不存在細菌及病原體，這時可在無菌下進行導尿。