免疫組化主要用在病理標(biāo)本上，病理標(biāo)本制作非常復(fù)雜。首先用福爾馬林即甲醛進(jìn)行固定。固定過程會(huì)導(dǎo)致福爾馬林蛋白和病理標(biāo)本上原有的抗原進(jìn)行交聯(lián)，交聯(lián)過程會(huì)導(dǎo)致抗原發(fā)生封閉。另外，后期病理標(biāo)本的制作過程中，會(huì)用到非常多的試劑，比如酒精、二甲苯等。試劑也會(huì)造成病理組織本身抗原發(fā)生封閉。還有加熱過程，也會(huì)導(dǎo)致抗原發(fā)生封閉?？乖忾]會(huì)造成的后果，是使抗原不能非常好的暴露出來，即不能顯露出來，最終會(huì)導(dǎo)致免疫組化的結(jié)果不能夠正常表現(xiàn)出陽性，即原來應(yīng)該陽性的部分由于抗原封閉之后不能造成明顯陽性表達(dá)，所以會(huì)影響免疫組化結(jié)果的判斷。
全世界都通用叫做抗原封閉修復(fù)的方法來解決這個(gè)問題。目前最主要的方法主要是兩種，一種是化學(xué)試劑方法，即用EDTA或者EGTA的方法，都可以使抗原很好被顯露出來，從而讓免疫組化陽性結(jié)果很好的表達(dá)出來。另外一種可以用高壓加熱修復(fù)，能使免疫組化的抗原很好的顯露出來，從而達(dá)到理想的免疫組化結(jié)果。
