在進行75克葡萄糖耐量試驗之前要做好充分的準備。實驗前三天每天進食碳水化合物不能少于150克，要保證有正常的體力活動。如果過度的運動或臥床休息，都有可能影響糖耐量檢查的結果。如果主食量吃得過少，也有可能造成檢查的結果不準確。同時要避免有嚴重的感染或者創(chuàng)傷，造成應激性的血糖增高。在實驗以前開始禁食10-16小時，不能少于八小時，但可以飲水。
早點到醫(yī)院靜靜休息片刻，取空腹血標本以后，飲用葡萄糖75克，加入溫開水或者礦泉水300毫升，五分鐘內飲用完畢。兒童按照體重每公斤1.75克葡萄糖給予葡萄糖服用，總量不要超過75克。
服糖以后30分鐘、60分鐘、90分鐘、120分鐘，分別取血標本。如果不適合多次取血，僅需要取服糖以后120分鐘的必須標本，血標本應該立即進行血糖的檢測。正常人服用葡萄糖以后，血糖會迅速升高，30-60分鐘達到高峰。血糖達到高峰以后會迅速地下降，一般在1.5-2小時下降到正常的水平。通過測定葡萄糖耐量試驗有助于幫助了解是否有糖代謝的紊亂，如果空腹血糖<6.1mmol/L，
服葡萄糖后兩小時<7.8mmol/L，屬于糖耐量正常。如果空腹血糖在6.1-7mmol/L之間，服糖以后兩小時<7.8mmol/L，考慮為空腹血糖受損。如果空腹血糖<7.0mmol/L，服糖以后血糖兩小時在7.8-11.1mmol/L間，考慮糖耐量減低。如果空腹血糖≥7mmol/L，服糖以后兩小時血糖≥11.1mmol/L，可以診斷為糖尿病。
