胚胎冷凍方法包括:
1、程序冷凍法:也稱平衡冷凍法,是將胚胎放入冷凍液中,慢速降溫至一個較低的溫度,約在-35℃到-80℃的階段,然后將它放入液氮中,是早期冷凍時主要采用的一種方法,但程序冷凍的降溫過程較長,其中胚胎細胞內(nèi)的水分易在此過程中形成冰晶,在解凍復(fù)溫時也有形成冰晶的風(fēng)險,冰晶會機械性損傷細胞膜和細胞器的膜結(jié)構(gòu),擠壓細胞的骨架,對胚胎造成冷凍損傷,因此在程序冷凍過程中,細胞受到損傷的程度較大,復(fù)蘇率約在70%;
2、玻璃化冷凍:近20年在程序冷凍的基礎(chǔ)上又進一步突破,出現(xiàn)了新的冷凍方法,稱為玻璃化冷凍,此方法主要是采用更高濃度及極其黏稠的冷凍保護劑處理胚胎,使胚胎在冷凍的過程中,從生理溫度急速降溫到-196℃,胚胎細胞內(nèi)外液體瞬間凍結(jié)成玻璃化固體狀態(tài)。與程序冷凍法相比,玻璃化方法冷凍過程中,胚胎細胞內(nèi)的液體不會形成冰晶,從而避免了冰晶對胚胎細胞的物理化學(xué)損傷,獲得了較好的冷凍效果,玻璃化冷凍胚胎復(fù)蘇率通常達到95%以上,若冷凍囊胚,效果則更好,復(fù)蘇率可達到99%以上,顯著的高于程序冷凍方法,優(yōu)勢也較明顯,所以越來越多的中心逐步開始使用玻璃化冷凍方法,也成為現(xiàn)階段胚胎冷凍的主要方法。